- Caratterizzazione di un nuovo modello di NAFLD e valutazione del potenziale effetto antisteatotico di estratti vegetali
- Characterization of a new model of NAFLD and evaluation of the potential antisteatotic effect of plant extracts
- Vornoli, Andrea <1986>
Subject
- BIO/14 Farmacologia
Description
- Nella presente tesi, abbiamo caratterizzato un modello di ratto trattato con dieta iperlipidica e streptozotocina (D), utilizzato per valutare i potenziali effetti anti-steatotici di una miscela contenente 5 estratti vegetali (caigua, soia, erba medica, carciofo e riso rosso fermentato) somministrata a due differenti dosaggi (0,3 [A] e 1 mg/Kg [B]) e confrontata con il controllo positivo eugenolo (E) ed il veicolo di somministrazione latte di soia (M). I valori concernenti colesterolo, LDL, glucosio, ALT ed il contenuto di lipidi nel tessuto epatico sono risultati aumentati in D, A ed M, rispetto ai CTR, e ripristinati significativamente in B ed E. Le attività marcatrici del CYP2E1 (p-nitrofenolo idrossilasi ed anilina-idrossilasi) e le analisi di Western blotting per le proteine CYP2E1 e CYP4A hanno evidenziato una significativa induzione su D, A ed M ed un parziale ripristino dei valori di controllo in B. Dal dosaggio del GSH e della carbonilazione delle proteine è stata evidenziata la presenza di stress ossidativo nei ratti iperlipidici, significativamente ridotta nel B. La presenza del colesterolo nella dieta iperlipidica è stata determinante per la significativa riduzione dei geni HMGCR ed LDLr. Dall’analisi di geni coinvolti nell’infiammazione e nello stress mitocondriale si è evidenziato un significativo aumento nei gruppi D, A e M rispetto al CTR, mentre una significativa riduzione si è osservata in B ed E. Per estendere la caratterizzazione del ratto HFD/STZ, in un nuovo esperimento abbiamo analizzato geni chiave del metabolismo del colesterolo e del trasporto degli acidi biliari. Abbiamo osservato un’induzione dei geni responsabili della formazione dell’acido colico CYP7A1 e CYP8B1, ma non di quelli dell’acido chenodeossicolico CYP27A1 e CYP7B1. Inoltre è emersa una diminuita espressione di SHP (gene chiave per l’inibizione feedback del CYP7A1 e del CYP8B1) e dei geni responsabili del trasporto degli acidi biliari, del colesterolo, e della fosfatidilcolina.
- In this thesis, we characterized a rat model treated with a high fat diet and low dose of streptozotocin (HFD/STZ, D), to evaluate the anti-steatotic effects of a 5 plant extracts mixture (caigua, soybean, alfalfa, artichoke and fermented red rice) administered at two different doses (0.3 [A] and 1 mg/kg [B]) and compared to the positive control eugenol (E) and the vehicle soy milk (M) administration. Cholesterol, LDL, glucose and ALT blood parameters values and liver lipids content were increased in D, A and M, with the respect to CTR, and significantly recovered in B and E. CYP2E1 specific activities (p-nitrophenol hydroxylase and aniline hydroxylase) and Western blot analysis for CYP2E1 and CYP4A proteins were induced in D, A and M, and partially restored in B. GSH and protein carbonylation analysis highlighted, compared to CTR, the presence of oxidative stress in HFD/STZ rats, which was significantly reduced in B. The analysis of genes involved in inflammation (IL6, TNFα) and mitochondrial stress revealed a significant increase in A, D, M groups, but not in E and B. The presence of 2% of cholesterol in the high fat diet determined a significant reduction of HMGCR and LDLr transcripts. To extend the characterization of our steatotic rat model, we analyzed key genes of cholesterol metabolism and bile acids transporters in a new experiment. It was observed an induction of CYP7A1 and CYP8B1 genes responsible for the formation of cholic acid (CA), but not of CYP27A1 and CYP7B1, which lead to chenodeoxycholic acid (CDCA). In addition, we observed a decreased expression of FXR-regulated SHP (the key gene for the feedback CYP7A1 and CYP8B1 inhibition) and of the genes responsible for the transport of bile acids (NTCP, MRP2/4, OATP1A1, OATP1B2, BSEP), cholesterol (ABCG5), and phosphatidylcholine (MDR3).
Date
- 2016-04-19
Type
- Doctoral Thesis
- PeerReviewed
Format
- application/pdf
Identifier
urn:nbn:it:unibo-18317
Vornoli, Andrea (2016) Caratterizzazione di un nuovo modello di NAFLD e valutazione del potenziale effetto antisteatotico di estratti vegetali, [Dissertation thesis], Alma Mater Studiorum Università di Bologna. Dottorato di ricerca in Scienze farmacologiche e tossicologiche, dello sviluppo e del movimento umano