- Nuove strategie di reindirizzamento nel disegno di virus Herpes Simplex oncolitici
- Novel retargeting strategies in the design of oncolytic herpes simplex viruses
- Petrovic, Biljana <1987>
Subject
- BIO/19 Microbiologia
Description
- La terapia virale oncolitica sfrutta l’abilità dei virus di infettare e uccidere le cellule e si propone come cura per i tumori che non rispondono agli attuali approcci terapeutici. Un herpes simplex 1 (HSV-1) attenuato, denominato T-Vec, è l’unico virus oncolitico approvato per l’impiego in clinica. In questo virus, la sicurezza è stata ottenuta a spese della virulenza. Per superare i limiti dell’attenuazione, una strategia alternativa è quella di alterare lo spettro d’ospite del virus. Il legame della glicoproteina D (gD) di HSV-1 ad uno dei suoi recettori attiva le glicoproteine gH/gL e gB, che eseguono la fusione. Finora gD è stata l’unica glicoproteina che ha permesso di reindirizzare con successo il tropismo di HSV-1. Il lavoro di questa tesi prevede lo sviluppo di HSV-1 oncolitici, reindirizzati a recettori tumore-specifici, per condurli alla fase traslazionale. Il tropismo di HSV-1 è stato modificato ingegnerizzando un ligando eterologo in gH (nel virus R-809) o in gB (in R-909). Il ligando eterologo è un frammento anticorpale variabile a catena singola (scFv) diretto contro HER2, recettore sovra-espresso in diversi tumori. Il reindirizzamento ottenuto tramite gB o gH conferisce ad HSV-1 proprietà molto simili al reindirizzamento conseguito tramite gD, in termini di replicazione virale e attività oncolitica in vitro. Le modificazioni in gB o gH sono state combinate con quelle in gD, ottenendo, per la prima volta, due HSV-1 reindirizzati contemporaneamente verso due recettori distinti. R-805, diretto contemporaneamente verso HER2 ed EGFR, è stato caratterizzato in vitro e si è messo a punto un modello in vivo col quale studiare la sua efficacia oncolitica. R-313 è risultato in grado di utilizzare alternativamente due recettori, per infettare le cellule tumorali e le cellule produttrici non tumorali, in quanto la produzione di un vettore oncolitico in una linea tumorale non è compatibile con la sperimentazione clinica.
- Oncolytic virotherapy exploits the ability of viruses to infect and kill cells and is envisioned as treatment for tumors that respond poorly to the current therapeutic approaches. The attenuated herpes simplex virus 1 (HSV-1), named T-Vec, is the only oncolytic virus approved so far for clinical practice. Safety was obtained at the expense of virulence. To overcome the attenuation limits, an alternative strategy consists in altering the host range of a virus. The binding of membrane-bound glycoprotein D (gD) of HSV-1 to one of its receptors activates the downstream glycoproteins gH/gL and gB. The latter executes the fusion virion-cell. So far, gD was the only glycoprotein that successfully enabled the retargeting of HSV-1. The work of this thesis focuses on the the development of oncolytic herpes simplex viruses (o-HSVs), retargeted to tumor-specific receptors, in order to bring retargeted o-HSVs to the translational phase. The tropism of HSV-1 has been modified by engineering a heterologous ligand in gH (in virus R-809) or in gB (in R-909). The selected heterologous ligand was a single chain variable fragment antibody (scFv) directed against HER2, a receptor overexpressed in several cancers. The retargeting achieved via gB or gH confers to HSV-1 very similar properties to the retargeting achieved via gD, in terms of virus growth and oncolytic activity in vitro. The changes in gB or gH were combined with those in gD, leading, for the first time, to two HSV-1 simultaneously redirected to two distinct receptors. R-805, directed simultaneously to HER2 and EGFR, has been characterized in vitro. An in vivo model to study its oncolytic efficacy was developed. R-313 was designed to enable the production of an oncolytic vector into a non-tumor cell line. R-313 is capable to use alternately two receptors, and to infect the tumor cells and the non-tumor-producing cells.
Date
- 2017-04-18
Type
- Doctoral Thesis
- PeerReviewed
Format
- application/pdf
Identifier
urn:nbn:it:unibo-24488
Petrovic, Biljana (2017) Nuove strategie di reindirizzamento nel disegno di virus Herpes Simplex oncolitici, [Dissertation thesis], Alma Mater Studiorum Università di Bologna. Dottorato di ricerca in Biologia cellulare e molecolare