- Valutazione preclinica di nuovi potenziali bersagli terapeutici per la cura del medulloblastoma.
- Preclinical evaluation of new therapeutic targets for Medulloblastoma treatment.
- De Marco, Ester <1982>
Subject
- BIO/11 Biologia molecolare
Description
- Il medulloblastoma (MB) è il tumore più comune del sistema nervoso centrale. Attualmente si riesce a curare solo il 50-60% dei pazienti che tuttavia presentano gravi effetti collaterali dovuti alle cure molto aggressive. Una recente classificazione molecolare ha ridistribuito le varianti più comuni di MB in quattro distinti gruppi. In particolare, il gruppo SHH e D sono caratterizzati da un’ alta espressione di MYCN ed associati a prognosi sfavorevole. MYCN è coinvolto nella regolazione della proliferazione cellulare, differenziazione, apoptosi, angiogenesi e metastasi. L’obiettivo di questo lavoro è la valutazione dell’attività antitumorale di oligonucleotidi diretti contro MYCN, sia in vitro su diverse linee cellulari di MB che in vivo in modelli murini xenograft ortotopici di MB. I risultati hanno dimostrato un’ottima inibizione della crescita in linee cellulari di MB, accompagnata da una riduzione della trascrizione genica e dei livelli proteici di MYCN. Inoltre, sono stati confermati tramite RT-PCR alcuni dei geni trovati significativamente variati nell’esperimento di microarray , dopo il trattamento. Molto interessanti sono stati geni quali BIRC5, che risulta down regolato mentre il gene p21 risulta up regolato in tutte le linee cellulari di MB utilizzate. Inoltre, sono stati generati modelli murini di MB utilizzando cellule precedentemente trasfettate per esprimere il gene della luciferasi e valutarne così la crescita tumorale tramite imaging bioluminescente in vivo (BLI), al fine di poter testare l’attività antitumorale data dagli oligonucleotidi. I risultati hanno dimostrato una buona risposta al trattamento come rilevato dalla tecnica di BLI. I dati preliminari prodotti, dimostrano che MYCN potrebbe esser un buon target per la terapia del MB nei casi in cui è overespresso. In particolare, una sua inibizione potrebbe presentare effetti indesiderati moderati in quanto è poco espresso dopo la nascita.
- Medulloblastoma (MB) is the most common paediatric tumor of central nervous system. Currently only 50-60% of the patients are successfully cured and many of the patients who survive exhibit serious side effects due to the very aggressive therapies they underwent. Recently, molecular classification revealed that MBs can be categorized in four distinct subtypes. In particular, subtype SHH and D are characterised molecularly by high levels of MYCN and are associated with the worst prognosis. The N-Myc protein is involved in the regulation of the cellular proliferation, differentiation, apoptosis, angiogenesis, metastasis. The purpose of this work is the evaluation of the specific anti-tumor activity of anti-MYCN oligonucleotides in vitro using different MB cell lines and in vivo, in xenograft MB mouse models. These treatments resulted in a remarkable reduction of the growing rate in Mb cell lines followed by downregulation in gene transcription and protein levels of MYCN. Moreover, I confirmed in RT-PCR some of the candidate genes that were found significantly differentiated in the microarray experiment, after treatment. I found very interesting genes like BIRC5, that is down-regulated, while p21 is up-regulated in all MB cell lines. I also generated MB mouse models using cells transfected with luciferase to evaluated tumor growth througt bioluminescence imaging (BLI) in vivo in order to test the oligonucleotide anti-tumoral activity. The results showed a good response to treatment as monitored by BLI tumor signal. Finally, the primary studies showed that MYCN could be a target for MB therapy when the overexpression is present. In particularly, due its very restricted expression pattern after bird side effects of systemic down-regulation of MYCN can be expected to be moderate.
Date
- 2012-05-03
Type
- Doctoral Thesis
- PeerReviewed
Format
- application/pdf
Identifier
urn:nbn:it:unibo-4075
De Marco, Ester (2012) Valutazione preclinica di nuovi potenziali bersagli terapeutici per la cura del medulloblastoma., [Dissertation thesis], Alma Mater Studiorum Università di Bologna. Dottorato di ricerca in Oncologia e patologia sperimentale: progetto n. 2 "Patologia sperimentale"